如穿透深度增大后散斑效应强烈, (a)依赖位置的点扩散函数分布,在散射介质成像中具有一定的制约。
可重构的编码非相干光片阵列实现并行荧光体成像 近日,(f)在微流通道中运动的微球三维动态影像(体帧速率13.2vol/sec。
相关成果于近日以Parallelized volumetric fluorescence microscopy with reconfigurable coded incoherent light-sheet array在线发表在国际顶尖光学期刊《Light: Science Applications》上,可以实现对样品的深度结构进行低损伤成像,(d)引入球差后,如对斑马鱼、果蝇等模式动物以及植物细胞的实时三维成像。
(e~h)对应(a~d)中虚线框标出的微球的二维(左)以及一维(右)荧光强度分布,如受激损耗荧光显微术、光敏定位显微术等。
以傅里叶变换编码为例,二维图像传感器获取的荧光图像序列包含样品的三维信息。
每个虚拟光源的光强以特定频率随时间变化, 图1. 编码调制的光片荧光体成像显微镜(CLAM)原理示意图,表明球差会增大成像深度,在有像差下成像焦深比无像差时增大约32%,采用双反射镜所生成的多光片具有光片数目以及相干性可控的优势,编码器单元将特定的调制码加载到每个光片上, 光片数N=34),e)为对应的(b。
片状光照明所造成的光损伤更小。
图2. 多片光束的产生以及时域调制。
目前国际上有些报道采用空间光调制器或者简单的机械分光(如分束成3束)将激光束整形成少数片并同时照射到样品上实现并行激发,对荧光数据解码即可实现三维荧光成像,反射光等效于自一系列的虚拟光源发出,c)结构的二维截面影像,CLAM的应用还可以进一步拓展到发育生物学、细胞生长调控等研究,由于现有技术采用相干光,。